美沙拉嗪联合思密达治疗溃疡性结肠炎大鼠的疗效及机制

摘要

目的：本研究通过观察思密达联合美沙拉嗪治疗大鼠UC模型肠道屏障功能改善情况,确定美沙拉嗪联合思密达治疗溃疡性结肠炎大鼠的疗效及机制,为临床联合治疗溃疡性结肠炎提供依据.方法：清洁级雄性SD大鼠80只(170-190g),随机分成:模型组70只和对照组10只.模型组大鼠每日饮用3％DSS水,连续7天后正常饮水7天,以建立溃疡性结肠炎模型.对照组每日饮用蒸馏水.模型组随机分成4组,分别给予美沙拉嗪、思密达、美沙拉嗪联合思密达、蒸馏水灌胃治疗14天,观察大鼠一般情况,14天后从每组中随机抽取8只给予乳果糖甘露醇灌胃,搜集尿液采用高效液相色谱分析法检测大鼠肠道通透性改变,处死所有剩余存活大鼠采集大鼠结肠标本.评估结肠病理变化,分别利用RT-PCR和Western Blot测定肠道Occludin、Claudin3、ZO-1、Claudin2表达的水平.结果：1.溃疡性结肠炎模型的建立:经DSS处理后大鼠体重下降,HE染色发现远端结肠炎症明显,表现为肠上皮隐窝扩张、溃疡,炎症细胞的浸润,在实验的中期炎症表现最重,后逐渐缓解.高效液相色谱分析法检测乳果糖甘露醇比值升高,大鼠肠道通透性升高.肠上皮紧密连接蛋白ZO-1,occludin,claudin3 mRNA等表达水平降低,claudin2 mRNA表达水平增加.2.各组给予药物治疗后,肠道通透性测量(乳果糖甘露醇比值L/M)，对照组＜美沙拉嗪思密达组＜美沙拉嗪组＜思密达组。结论：无论从症状和体征上,DSS处理大鼠的表现和人类溃疡性结肠炎表现相似,因此DSS经饮水途径可以成功建立溃疡性结肠炎动物模型.模型动物肠上皮通透性增加,肠上皮紧密连接损伤,紧密连接蛋白组成改变.DSS溃疡性结肠炎大鼠模型给予美沙拉秦联合思密达、美沙拉嗪、思密达药物治疗后,可以通过改变肠上皮紧密连接蛋白表达,影响肠黏膜通透性等途径促进肠黏膜的修复.