黑色素瘤相关抗原MAGE-A11对p53转录活性的影响

摘要

目的:本课题旨在研究黑色素瘤相关抗原MAGE-A亚家族中MAGE-A11对p53转录活性的影响,旨在了解MAGE-A11在肿瘤发生发展中的作用机制.方法:利用基因转染、荧光素酶报告基因分析、RT-PCR、Western-blot及克隆形成实验方法研究了人黑色素瘤抗原MAGE-A 11对p53转录活性的影响.结果:荧光素酶报告基因分析结果显示,单独转染p53质粒组的荧光素酶活性和空载体对照组相比显著增加(P＜0.05);共转染恒定量p53质粒和逐渐增加量(100ng、200ng、400ng)MAGE-A11质粒之后,各实验组的荧光素酶活性分别为48.90±4.77、60.11±2.66、51.47±4.52,与单独转染p53质粒组相比,明显增高(P＜0.05);单独转染400ng MAGE-A11质粒组的荧光素酶活性,与空载体对照组相比,没有明显变化(P＞0.05).此结果提示外源性MAGE-A11可增强p53的转录活性,但不存在剂量依赖性.RT-PCR和Western-blot结果显示,MAGE-A11对p21WAF1的表达均无影响.克隆形成实验结果显示,单独转染p53质粒组的细胞克隆数明显少于空载体对照组(P＜0.05);共转染p53和MAGE-A11质粒组的细胞克隆数明显少于单独转染p53质粒组(P＜0.05);单独转染MAGE-A11质粒组的细胞克隆数与只转染空载体质粒组相比,没有明显变化.这些结果提示MAGE-A11可增强p53的转录活性及由此引起的抑制细胞增殖的功能.结论:外源性MAGE-A11可促进p53的转录活性。