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大黄鱼hepcidin的克隆表达及功能特征的初步研究

摘要

Hepcidin是一种由肝脏合成的富含半胱氨酸的小分子的阳离子抗菌肽,为大黄鱼天然免疫中重要的非特异性免疫分子。通过对大黄鱼poly(I:C)诱导的脾脏组织cDNA文库测序发现多条Hepcidin基因的cDNA序列,我们根据序列的相似度将大黄鱼的hepcidin分为五类。 全基因合成含3个hepcidin-Group 3成熟肽DNA序列的一段重复序列,成熟肽序列之间用羟胺切割位点连接,构建得到了真核表达载体Hepcidin-pPICZαA,同时利用毕赤酵母成功表达hepcidin-Group 5去信号肽部分,然后用纯化的hepcidin去信号肽部分做抑茵活性分析,分析表明:指示菌初始浓度为0.6-1.2×104 CFU/mL时,该多肽对指示菌V.Par有较为明显的抑制作用,该活性结果正在进一步的分析验证。

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