shiva-1a基因在杆状病毒中的表达及其表达产物抑菌活性的检测

摘要

根据GenBank上shiva-la的成熟肽基因序列，人工合成shiva-la基因并加入6×His标签。将shiva-1a基因克隆到杆状病毒转座载体pBacFast-Dual中，筛选重组质粒，转化大肠杆菌DH10OBas感受态细胞，经过蓝白斑筛选得到重组杆状病毒DNA，以脂质体介导法转染Sf9昆虫细胞，待细胞出现病变后，收集上清液从而获得重组杆状病毒。用此杆状病毒感染的Sf9细胞，Western Blot检测出分子量约5ku的shiva-1a多肽，与预期结果大小一致。体外抑菌试验证明，表达的shiva-1a多肽对大肠埃希氏菌(DE3菌株)具有抑菌活性。