间接ELISA检测鼠抗DEV特异性血清IgG和肠道IgA方法的建立

摘要

本文旨在为肠炎病毒(DEV)gC基因疫苗体疫免疫和粘膜免疫检测提供稳定的方法。用鼠抗DEV血清抗体和肠道IgA抗体作为阳性样本，对建立检测鼠抗DEV特异性血清IgG和肠道分泌IgA间接ELISA方法各个条件进行优化。鼠抗DEV特异性血清IgG和肠道分泌IgA间接ELISA方法的抗原包被浓度分别为0.5μg/ml和1μg/ml，一抗工作浓度分别为1：8和原液，酶标抗体工作浓度为1：5000和1：8000，一抗孵育温度和时间都为37°C1h，酶标抗体孵育温度和时间分别为37°C1h和37°C2h，底物作用时间都为40min，阴阳性临界值分别为0.259和0.297，具有良好的特异性和重复性。本研究建立的两种间接ELISA方法能为DEV gC基因疫苗的体液免疫和粘膜免疫检测提供稳定的检测方法。