流行性乙型脑炎病毒E蛋白可溶性原核表达

摘要

本研究旨在表达出可溶性流行性乙型脑炎E蛋白，为乙脑的诊断提供抗原。根据GenBank上公布的JEV基因序列，设计带酶切位点的特异性引物，通过RT-PCR方法获得E蛋白基因，将其克隆测序后插入pBCX表达载体。PCR筛选和酶切鉴定后，提取阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG(O.5mM)诱导后，取样进行SDS-PAGE电泳和western blot分析。结果显示表达的融合蛋白大小为88kD，表达量占菌体蛋白30%，且绝大部分为可溶。转膜后用化学发光底物显色，在约88KDa位置出现目的条带，说明抗原性较好。表明己成功地表达出该可溶蛋白。