4种病原菌免疫富集刷快速检测方法的建立及应用

摘要

近年来采用免疫磁珠富集细菌的研究非常热门，本研究以高分子细丝材料做成刷状富集固相载体，原理与效果与免疫磁珠富集细菌相同，并具有可以同时富集不同菌检项目，容易标记、富集后与样液更容易分离、洗涤、处理的优势，建立了一种新型、快速的检测沙门氏菌、大肠杆菌、单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌的方法;在固相载体材料的选择上比较了聚乙烯、尼龙和锦纶作为富集刷的性能，优化确定了富集刷的材料及制作工艺。抗四种病原菌的IgG分别与富集刷表面偶联，通过偶联抗体量及偶联时间的优化，最终建立起可同时检测四种病原菌的免疫富集刷快速检测方法。该方法与国家标准检测方法、3MPetrifilmTM Plates微生物快速检测法进行分离培养鉴定实验比较，结果显示免疫富集刷法与国家标准方法和3M PetrifilmTMPlates微生物快速检测法的检测结果无显著差异，但可节省一半时间及人力和试剂的成本消耗。对检测添加菌的最低检出线敏感性实验结果表明免疫富集刷法比国家标准检测方法低，但优于3M PetrifilmTM Plates微生物快速检测法。因此，所建立的病原菌快速检测方法具有快速、敏感、易操作等特点，相关检测技术方法已经获得专利支持。