重组胸腺素α1在大肠杆菌中的表达与活性检测

摘要

重组胸腺素alpha 1(Tα1)基因在大肠杆菌中进行表达。根据大肠杆菌密码子偏爱性合成Tα1基因并连接到pMD18-T载体上，双酶切回收的Tα1插入到pET32a后，转化大肠杆菌BL21，IPTG诱导，经15％SDS-PAGE检测，胸腺素α1获得可溶性表达。检测到与目的蛋白相对分子量(21.8KDa)相符的条带。重组Tα1在大肠杆菌中获得可溶性表达。诱导表达菌高压破碎后进行亲和层析纯化，收集的洗脱蛋白峰经脱盐处理后，15％SDS-PAGE检测纯化效果。通过BALB/c小鼠脾淋巴细胞转化实验测定纯化胸腺素α1融合蛋白的活性，与人用胸腺素α1的活性比较结果显示，基因工程表达的胸腺素α1明显具有促进淋巴细胞增殖的活性。