牛病毒性腹泻病毒RT-PCR方法的建立及应用

摘要

根据牛病毒性腹泻病毒(Bovinc viral diarrhea virus，BVDV)代表株NADL的NS5B基因序列，设计合成2对引物进行套式PCR,利用该方法扩增出360bp的特异性片段，通过对此特异性片段的克隆片列测定以及计算机系统分析证实，该片段的基因序列与BVDV Ⅰ代表株有94％的同源性。应用该方法检测了某生物制品厂提供的鼢样品(血清、细胞等)，其中2份为阳性。试验表明，该方法可以用做BVDV快速检测的方法，并证实了生物制品生产中常用的细胞和血清已经存在着BVDV的污染.所以生物制品生产过程中的材料以及制成品进行BVDV的检测是排除其BVDV污染的一个重要手段，也是非常重要的。