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不同剂量鸭IFN-α真核表达质粒基因枪免疫对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭细胞和体液免疫调节作用研究

摘要

为探索鸭α干扰素(IFN-α)真核表达质粒(peDNA-SDIFN-α)对鸭瘟弱毒疫苗免疫鸭的免疫调节作用,本研究将pcDNA-SDIFN-α以1、3和6μg/只3个剂量用基因枪轰击法分别免疫28日龄鸭,以PBS和空载体质粒pcDNA3.1(+)为对照,所有鸭15d后接种鸭瘟(DP)弱毒疫苗,接种后第3、7、14、21、28、35,49、63,84 d采血用淋巴细胞增殖试验(MTT法)测定鸭外周血中T淋巴细胞转化效果和第7、14、21、28、35、49 d采血用流式细胞仪(FACS)测定CD3+T淋巴细胞数量的动态变化。第7、14、21、28、35,49、63、84、105、126、154、182 d采血用间接EL,ISA法检测血清抗体水平。结果发现:不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭外周血T淋巴细胞转化功能均极显著或显著高于弱毒和空载体对照组。不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭CD3+T淋巴细胞数量均显著或极显著高于弱毒和空载体对照组。在第7 d时,所有组鸭血清抗体水平都迅速升高,在28 d时达到高峰,其高抗体水平维持一段时间后缓缓下降。不同剂量pcDNA-SDIFN-α免疫组鸭血清抗体IgG于7~154 d高于弱毒对照组和空载体对照组,有显著差异。在诱导细胞免疫和体液免疫方面,弱毒和空载体对照组间无显著差异。研究表明,pcDNA-SDIFN-α提前15 d免疫能显著增强DP弱毒疫苗诱导的鸭细胞免疫和体液免疫能力,以基因枪免疫1μg/只的效果最佳,是一种良好的增强DP弱毒疫苗细胞免疫的分子佐剂。

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