健腰密骨片对成骨细胞增殖分化和BMP信号通路报导基因活性的影响

摘要

目的：探讨健腰密骨片对成骨细胞的影响及作用机制，为开发治疗骨质疏松症的新药奠定实验基础.方法：常规培养前期实验建立的转染12×SBE-OC-Luc报导基因的成骨细胞株OCT-1细胞(以下简称12×SBE-OC-Luc-OCT1细胞),采用健腰密骨片含药血清进行干预48小时,并以BMP2纯化蛋白(50ng/ml)为阳性对照.用MTT法检测成骨细胞增殖率,实时荧光定量RT-PCR检测成骨细胞中Type Ⅰ Collagen mRNA、Osteocalcin mRNA和BMP2 mRNA的表达以及荧光检测成骨细胞12×SBE-OC-Luc的活性.结果：与正常对照组比较,健腰密骨片能明显促进成骨细胞的增殖(P＜0.05),提高了57.3％;健腰密骨片可显著提高成骨细胞中Type Ⅰ Collagen mRNA、Osteocalcin mRNA和BMP2 mRNA表达量(P＜0.05),分别提高了7.5倍、2.93倍和1.87倍;健腰密骨片能明显促进成骨细胞中BM对报导基因12xSBE-OC-Luc的荧光素酶活性(P＜0.05),与正常对照组相比提高了4.7倍.结论：健腰密骨片可明显促进BMP2、Type Ⅰ Collagen和Osteocalcin的表达,并可明显促进BMP信号通路报导基因12xSBE-OC-Luc的活性,从而促进成骨细胞的增殖与分化.