O型FMDV VP1基因与大肠杆菌不耐热肠毒素LTB基因的融合表达及表达产物的免疫原性研究

摘要

以质粒pMDTLT为模板、用PCR的方法扩增出LTB基因,然后将其插入到pETVP1质粒中VP1基因的上游、构建了含有融合基因LTBVP1的表达质粒pETLTBVP1,转化宿主菌BL21(DE3)LysS后进行诱导表迭.表达产物经SDS-PAGE分析表明重组蛋白以包涵体的形式表达、分子量约39KD；经Western-blot 分析表明重组蛋白能与FMDV阳性血清及兔抗霍乱毒素(CT)血清反应,说明融合蛋白保持了LTB和VP1各自的免疫学活性。动物实验表明:该融合蛋白通过腹腔接种能诱导小鼠产生较强的免疫应答反应,其水平高于试验中选用的普通商品口蹄疫苗所诱导的抗体水平.