鸡IL-18成熟蛋白基因变构体毕赤酵母表达载体的构建及表达

摘要

为提高IL-18成熟蛋白基因在真核系统中高效表达,对其进行定点突变,使酵母低频密码子突变为偏嗜性密码子,构建了IL-18成熟蛋白变构基因真核重组表达载体pPICZαA-MI118,并将其转化入P.pastoris X-33.重组菌株X-33/pPICZαA-MI118经1％甲醇诱导后,表达产物的上清液经SDS-PAGE检测,结果在上清液中发现目的条带,对其进行Western blot检测,约在19KD处有特异性蛋白条带,与预期的分子量一致。结果表明,IL-18成熟蛋白变构基因在毕赤酵母中成功的进行了表达。