减毒沙门氏菌介导的小鼠肝炎病毒S1基因DNA疫苗的免疫特性分析

摘要

根据GenBank公开序列自行设计一对引物,通过RT-PCR扩增出小鼠肝炎病毒的全长S1基因,并将其插入真核表达质粒pVAX1中,构建出重组真核表达质粒pVAX1-S1.将重组质粒转染COS-7细胞,采用间接免疫荧光检测出S1蛋白的体外表达.将重组质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207中,构建出运送DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-S1).分别以5×108 CFU、1×109 CFU、2×109 CFU剂量的重组菌口服接种6周龄BALB/c小鼠,试验结果表明,重组菌对小鼠具有良好的安全性.以109 CFU剂量的重组菌口服免疫小鼠,抗体检测结果显示,一免后2周即能检测到针对S1蛋白的特异性血清抗体,在二免后2周和三免后两周与SL7207(pVAX1)空载体免疫组之间的血清抗体水平分别存在显著性差异(P＜0.05)和极显著性差异(P＜0.01).在三免后两周重组菌免疫组出现了较高水平的肠黏膜抗体.