纳米荧光探针及其标记P450的光谱性质研究

摘要

目的研究纳米荧光探针及其标记蛋白的光谱的特性,并对其影响因素进行深入地探讨,以期建立新型荧光探针生物分析技术.方法用不同量的还原剂在煮沸搅拌条件下还原各种金属离子,制得不同粒径的纳米颗粒,采用纳米颗粒表面修饰、连接技术与蛋白结合,组装成纳米标记蛋白.利用吸收光谱仪、投射电子显微镜以及荧光光谱仪,研究纳米颗粒及其荧光标记蛋白的物理性质及光谱性质.结果 1、紫外-可见吸收光谱随胶体金纳米颗粒粒径的减小,525 nm处吸收峰从无到有,强度随胶体金纳米颗粒粒径的减小而增加,标记蛋白后在525 nm处的吸收强度均较原纳米颗粒增强.2、538 nm激发,胶体金在811 nm处有荧光发射,且标记蛋白后发射强度发生了明显的增强,说明了蛋白对于胶体金的荧光有很强的增加作用.3、铕纳米颗粒的紫外吸收光谱随纳米颗粒粒径的减小275 nm处紫外吸收强度逐渐增强,而275 nm激发的荧光强度却随之降低,且发射波长从378.8 nm红移至396.4nm,位移了17.6 nm.4、硫辛酸修饰后的铕纳米颗粒荧光强度均降低,与结合蛋白后荧光强度又明显增强,且发射波长明显蓝移.5、蛋白浓度在2.3×10-7-1.0×10-5mol/L与纳米金标记蛋白荧光强度呈线性关系,检出限为2.4×10-8mol/L.