猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5-M在大肠杆菌中的融合表达及其ELISA诊断方法的建立

摘要

利用谷胱苷肽-S-转移酶(GST)表达系统将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5和ORF6基因依序串联于GST下游,并在大肠杆菌中成功表达,获得了大小约为60kD的融合蛋白GST-GP5-M,Western-blot检测证实表达的融合蛋白具有良好的生物学活性.以纯化的融合蛋白为抗原建立了猪繁殖与呼吸综合征P56-ELISA检测方法,与国外试剂盒IDEXX-ELISA总符合率为94.1％,表明建立的P56-ELISA检测方法具有很好的特异性和敏感性.进一步分析了P56-ELISA检测结果与血清中和试验的相关性,经回归函数分析,发现在临床送检猪血清中的抗融合蛋白GP5-M抗体水平(OD630nm)与中和抗体水平之间的相关性并不高。