间歇低氧细胞培养箱的制作及工作模式的确立

摘要

目的：自行设计出新型的间歇低氧细胞培养箱并进行验证。方法：将ECV304人脐静脉细胞系平铺于六孔板，密度为1X106个/孔。再将细胞六孔板放置细胞培养箱培养24小时待细胞贴壁后置于间歇低氧细胞箱中。经过5min/lOmin低氧使间歇低氧箱内的氧浓度达到最低为1%;再经过lOmin/5min的复氧时氧浓度达到21%，共15min完成一个循环。在IH暴露0h,4h,8h,12h,16h,20h,24h后分别使用ELISA法测定上清液中IL-6和MDA水平。结果：随着间歇低氧时间的延长，细胞培养液上清中IL-6及MDA的浓度也逐渐上升，且在间歇低氧16小时时达到高峰。而在模式B条件下，随着间歇低氧时间的延长，细胞培养液上清中IL-6及MDA的浓度也有上升，但IL-6及MDA浓度与时间不存在相关性。结论：成功地实现了细胞培养箱内氧浓度周期性变化，并确立了最低氧浓度为1%,低氧5分钟/复氧10分钟、16h的间歇低氧模式较适合相关研究。