大熊猫与牦牛和奶牛朊病毒蛋白全基因序列分析

摘要

朊病毒疾病是人和动物的一系列神经退化性疾病,迄今为止,国内外尚未见大熊猫、牦牛的PRNP及奶牛PRNP多态性报道.从分子水平上研究动物对朊病毒疾病的遗传易感性,进而为采取有效的预防措施提供理论依据十分必要.根据已报道的哺乳动物朊病毒基因序列设计引物对,采用PCR方法扩增了大熊猫、牦牛、奶牛的朊病毒基因,将其克隆到T—VECTOR,进行序列测定和分析.结果表明:获得了大熊猫、牦牛、奶牛朊病毒开放阅读框全基因,基因全长皆为795个核甘酸,包含PRNP各功能区域,其中含有6个八肽重复区,并编码264个氨基酸.经酶切鉴定,其中均含有Pat、Kpn、Nco酶切位点,与文献报道一致;所克隆的三种物种朊病毒基因和氨基酸序列在95﹪以上.其中,检测到了多态性位点,对其进行了易感生、潜伏期及种间屏障连锁分析.并与其它动物进行了PRNP同源性比较.