南方红豆杉水提物联合厄洛替尼协同抑制人肺癌A549细胞增殖机制研究

摘要

目的:研究南方红豆杉水提物联合厄洛替尼对人A549肺癌细胞生长的影响及其对表皮生长因子受体/促分裂素原活化蛋白激酶(Epidermal Growth Factor Receptor/Mitogen-activated Protein Kinase,EGFR/MAPK)通路的作用.分析南方红豆杉水提物联合厄洛替尼抑制人A549细胞增殖的协同作用.方法:体外无菌培养的A549细胞,经不同浓度的厄洛替尼联合南方红豆杉水提物干预2小时后,采用Western-blot方法检测各实验组细胞中表皮生长因子受体(Epidermal Growth Factor Receptor EGFR)、磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、细胞外调节蛋白激酶(Extracellular Regulated Protein Kinases 1/2 ERK1/2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(P-ERK1/2)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(Phosphorylated c-Jun N-terminal Protein Kinases P-JNK)的蛋白表达,RT-PCR方法测定细胞中EGFR、ERK1/2、JNKmRNA水平.结果:Western-blot检测各实验组蛋白表达情况,与对照组相比,各剂量组的P-EGFR、P-ERK、P-JNK蛋白表均明显下调(P＜0.05),EGFR、ERK蛋白未见明显变化(P＞0.05).低剂量厄洛替尼联合标准剂量南方红豆杉组P-EGFR、P-ERK、P-JNK蛋白表达明显低于标准剂量厄洛替尼组(P＜0.05).RT-PCR测定细胞中mRNA水平,与对照组相比,各剂量组的ERK1、ERK2mRNA明显下调(P＜0.05),EGFR、JNKmRNA无明显改变(P＞0.05).低剂量厄洛替尼联合标准剂量南方红豆杉组ERK2mRNA表达明显低于标准剂量厄洛替尼组(P＜0.05).结论:实验结果表明,南方红豆杉联合厄洛替尼可能通过抑制EGFR/MAPK信号通路而起到抑制肿瘤细胞生长的效果.南方红豆杉水提物联合厄洛替尼的抑瘤效果具协同作用.