高浓度尿素诱导人脑微血管内皮细胞产生炎症因子

摘要

目的:研究尿毒症性脑病高浓度尿素诱导脑微血管内皮细胞产生炎症因子及机制.rn 方法:以相同渗透压的甘露醇为对照,高浓度尿素干预细胞3、6、12和24h后,免疫荧光法观察细胞内肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的表达.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TNF-α、iNOS、环氧合酶-2(cycloxygenase-2,COX-2)、核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)/p65和p-p65的表达水平.NO试剂盒检测细胞NO含量.rn 结果:尿素刺激诱导胞浆内TNF-α和iNOS阳性表达增强.细胞中TNF-α、COX-2和p-p65蛋白水平在3和6h高于对照组(P＜0.01);iNOS蛋白水平持续增高(P＜0.01).NO含量在3h增多明显(P＜0.05).rn 结论:高浓度尿素可通过NF-κB/p65信号通路诱导脑微血管内皮细胞产生TNF-α、COX-2和iNOS,而iNOS的诱导性表达可能改变细胞NO含量而影响其结构和功能.