佐剂铝和PolyIC在结核亚单位疫苗中的佐剂效应

摘要

目的:观察重组抗原Ag85b和ESAT6-CFP10(Pro)联合氢氧化铝佐剂(Al)和PolyIC佐剂(IC)诱导小鼠的免疫效果及对豚鼠的结核预防作用.方法:小鼠免疫原性评价:设PBS①对照组、Pro②组、Al+IC③组、Pro+Al④组、Pro+IC⑤组、Pro+Al+IC⑥组.免疫3次,间隔为10天,末次免疫后2周,采血检测血清抗体水平,并分离脾淋巴细胞,检测分泌IFN-γ的T淋巴细胞水平.豚鼠保护力评价:设①生理盐水组(NS组)、BCG②组(阳性对照组)、Pro+Al+IC③组.免疫3次,间隔10天,末次免疫30天后,每只攻毒Mtb 500 CFU,6周后解剖,评价肝脏、脾脏和肺脏病变指数和脾荷菌数.结果:1细胞免疫应答:Al+IC组、Pro组、Pro+Al组、Pro+Al+IC组、Pro+IC组Ag85b特异性的IFN-γ SFC分别为0.92±2.06、13.17±5.64、20.08±15.00、92.25±36.68、60.08±38.07,Pro+Al+IC组显著高于其它各组;EC特异性SFC分别为0.92±3.20、12.00±4.04、12.92±6.64、32.00±6.67、10.25±12.00,Pro+Al+IC组值显著高于高于其它各组.2体液免疫应答:Pro组、Pro+Al组、Pro+Al+IC组、Pro+IC组Ag85b蛋白的抗体水平分别是4.31±0.15、5.06±0.12、5.31±0.19、5.16±0.16,Pro+Al+IC组效价最高,与Pro+Al组比较有统计学意义,P＜0.05,但与Pro+IC组比没有统计学意义;这4组EC蛋白的抗体水平分别是2.10±0.85、3.41±0.62、4.46±0.23、3.6±0.67,Pro+Al+IC组值最高,且与Pro+Al组、Pro+IC组比均具有统计学意义(P＜0.05).3、豚鼠保护力:NS组、BCG组、Pro+Al+IC组豚鼠病变指数分别是55.00±15.89、3.00±4.83、43.00±17.54,脾菌分离对数值分别为5.61±0.48、0±0、5.22±0.66,Pro+Al+IC组脏器综合病变指数和脾菌分离数均显著高于BCG组,且与NS组无显著差异.结论:氢氧化铝佐剂和PolyIC佐剂联合使用可协同增强结核分枝杆菌抗原Ag85b和EC的细胞免疫应答和体液免疫应答;但配伍Ag85b和EC构成的重组亚单位疫苗对豚鼠预防性保护力较弱,不适合用作暴露前预防.