辛酸沉淀结合阴离子交换层析纯化马IgG的研究

摘要

目的:以辛酸沉淀结合离子交换层析纯化破伤风抗毒素马免疫血浆,获得高质量的马IgG,为抗毒素F(ab')2的制备奠定基础。方法:通过对辛酸沉淀马血浆过程中的PH、辛酸浓度以及血浆稀释倍数的实验设计(DoE),研究不同条件对IgG纯度、效价、比活性、浊度以及过滤速度的影响,确定各工艺参数的可操作区间,并结合Capto DEAE阴离子交换层析以流穿模式进一步纯化IgG.结果:马血浆经一步辛酸沉淀获得的IgG纯度(SDS-PAGE)大于92％、液相色谱(FPLC)纯度大于95％,比活性较血浆提高2.14±0.29倍;辛酸沉淀后的IgG样品经离子交换层析,可有效去除聚合体以及小分子杂质,将纯度提高至95％(SDS-PAGE)和98％(FPLC).结论:马血浆经辛酸沉淀和阴离子交换层析可获得高纯度、高比活的IgG.