快速免疫组织化学检测棉花子叶外源基因表达的方法

摘要

免疫组织化学是鉴定组织或细胞内多肽、蛋白质及其他类型分子表达或存在的常用方法,广泛用于多肽和蛋白在组织内的定位、定性及定量研究.免疫组化中植物组织的制片一般有石蜡切片、冰冻切片和特殊组织的直接制片,其中直接制片方法简单,但要受到植物材料、通透性、脱色时间等多种因素的限制,不易取得好的染色效果.本实验以棉花子叶为实验材料,通过叶片活体注射的方法引入外源基因,共培养3d后,采用多聚甲醛固定、室温下抽真空处理1h、抗体标记和染色lh的直接制片法可取得较好的染色效果,而且避免了繁琐的制片过程,可快速有效的检测外源基因的表达,其中叶片取样大小是直接制片后进行免疫组化取得好结果的重要因素.