犬弓首蛔虫免疫抑制卵巢信息蛋白基因的克隆及其表达分析

摘要

本试验以犬弓首蛔虫cDNA文库中的EST数据为基础,采用RT-PCR方法扩增出犬弓首蛔虫的免疫抑制卵巢信息蛋白基因.将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pMDTM 19-T Vector载体,对经转化的重组菌液进行PCR鉴定,将鉴定为阳性的重组菌液进行测序.测序结果表明,T.canis的免疫抑制卵巢信息蛋白的基因片段大小为1270bp,编码282个氨基酸残基；同源分析发现,TcF-IOM与猪蛔虫的免疫抑制卵巢信息蛋白同源性最高,为54％；功能结构域分析发现,免疫抑制卵巢信息蛋白主要含有3个几丁质结合蛋白结构域；同时对该基因在T.canis雌虫、雄虫和雌虫各组织的表达谱进行了研究,结果显示TcF-IOM基因只在T.canis雌虫中高量表达,是雌虫特异的基因.对雌虫各组织的表达谱分析中发现TcF-IOM基因在输卵管、卵巢和子宫有较高量的表达.这种表达特征与生理功能的关系有待于进一步深入研究.