柔嫩艾美耳球虫Etgam22基因克隆表达及其免疫保护性研究

摘要

本文从E.Tenella扬州株纯化的配子体中提取总RNA,经RT-PCR扩增出Etgam22基因片段.将目的片段插入到pGEM-T-Easy载体,常规转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,蓝白斑筛选后,对经酶切和PCR鉴定为阳性的重组质粒进行测序.以黄羽肉鸡为试验动物,以平均增重、相对增重率、病变记分与卵囊减少率等为评价指标,对重组蛋白的免疫保护效果进行了初步研究,并对其诱导的特异性免疫应答水平进行了检测.结果显示:重组蛋白免疫后均能诱导一定的细胞免疫和体液免疫水平,抗体水平、CD4+水平、CD8+水平等免疫指标均高于未免疫未攻虫组;与未免疫未攻虫组相比,重组蛋白免疫组在一定程度上能提高增重,降低病变记分和减少卵囊产量,其中又以重组蛋白中剂量组的免疫保护效果稍好,但均未达到卵囊免疫组的免疫保护水平.