猪瘟病毒Npro蛋白核仁穿梭及其对病毒复制的影响

摘要

为了研究Npro蛋白细胞内运输对病毒复制的影响，构建了表达IRF3-Npro融合蛋白的突变体病毒vSM-IRF3和表达失去抑制干扰素产生功能的Npro-D136N的突变体病毒vSM-D136N，试验结果表明，vSM-IRF3表达的IRF3-Npro融合蛋白只定位于细胞质;vSM-IRF3的平均滴度比亲本病毒约低200倍，而vSM-D136N的平均滴度比亲本病毒低约30倍;多步生长曲线显示，vSM-IRF3的复制在病毒复制周期的晚期(36-72 hpi)受到明显抑制;干扰素启动子活性检测结果表明，vSM-IRF3与亲本病毒一样不诱导干扰素产生。以上结果证明，阻碍Npro蛋白的核仁穿梭是影响vSM-IRF3复制周期晚期增殖的主要因素。本研究首次发现，Npro蛋白具有独立于其切割活性和抑制干扰素产生功能的核仁穿梭功能;IRF3可以引起Npro蛋白细胞内的重新分布;Npro蛋白的核仁穿梭对于猪瘟病毒在其复制周期晚期的有效复制是必须的。