赤羽病SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立和初步应用

摘要

本研究根据赤羽病毒(AKAV)的S基因序列设计合成了引物,RT-PCR扩增得到目的基因片段并克隆到PGM-T载体得到质粒标准品。通过对荧光定量PCR反应条件的优化,建立了SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测AKAV的方法。该方法的检测敏感性达到926copies/25?L,并具有较好的重复性和特异性。本试验方法的建立对于加强进出口牛、羊AKAV的检验检疫具有十分重要的意义。