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超低温冷冻对小鼠桑椹胚多能性因子Oct-4表达的影响

摘要

本实验旨在探讨昆明白小鼠桑堪胚超低温冷冻后Oct-4表达的变化与胚胎发育潜力的关系。胚胎采用OPS法冷冻。毒性组胚胎未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜胚胎为对照组。胚胎解冻后,检测Oct-4mRNA与蛋白的表达,通过观察其形态正常率、囊胚发育率和囊胚细胞数来综合判断其体外发育能力。qRT-PCR及Western Blot检测结果表明:桑堪胚中Oct-4mRNA的表达量,冷冻组和毒性组较对照组相比显著下降(P<0.05),蛋白表达量三组间无显著差异。桑堪胚处理后的形态正常率以及桑堪胚培养48h后的囊胚发育率(96.67%~100%)和囊胚细胞数(89.67~92.33)三组间无显著差异。结果显示,玻璃化冷冻保存小鼠桑堪胚后多能性基因Oct-4mRNA表达的变化并未影响其体外发育潜力。

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