新型固定化黄嘌呤氧化酶的制备与性能评价

摘要

黄嘌呤氧化酶(XOD)是嘌呤代谢的关键酶之一,能催化次黄嘌呤生成黄嘌呤,进而生成尿酸并产生过氧化氢.主要应用于临床医学、食品及医药工业领域.然而XOD同大多数游离酶一样,使用过程中存在稳定性差,最适反应条件范围窄和难以回收利用等缺点,增加了酶的使用成本.因此,通过酶的固定化,使酶在保持其高效、专一的同时还具有稳定性高,可多次重复使用等优点.目前,常用的固定化载体主要有壳聚糖、树脂、纤维素薄膜、纳米粒子等.本文以碳纳米管包覆的硅胶为固定化酶载体，利用材料表面裸露的-NH2和-OH基团与XOD残端的-NH2和-COOH基团生成的酰胺键，以及碳纳米管的强大的吸附性能，将游离的XOD成功固定在硅胶表面，制备出CNTO@Si02固定的XOD。既能提高XOD的负载量，又具有较好的机械强度，CNTs良好的热稳定性和生物相容性，能够提高酶的固定化率，更大地保留活性，并对不同的固定化XOD性质进行比较，使其在酶固定化和分析化学领域已有较广泛应用，为后续生物色谱法的建立和黄嘌呤氧化酶抑制剂的筛选工作奠定基础。