基于超高效合相色谱对黄芪中5种主要黄酮类化合物的快速检测

摘要

本试验首次建立了超高效合相色谱法(Ultra Performance Convergence Chromatography,UPC2)快速分离和测定黄芪中5种主要黄酮类化合物(毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷、芒柄花素)的方法.黄芪样品用80％乙醇提取后,以超临界CO2-0.2％磷酸甲醇溶液为流动相,梯度洗脱,色谱柱为Waters ACQUITY UPC2BEH柱(100mm×3.0mm,1.7μm),柱温为40℃,流速为0.4mL/min,进样量为1μL,检测波长为280nm.整个分析过程仅需15min,分析速度是传统液相色谱的3倍以上.毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的检出限及定量限范围分别在0.3～0.5mg/kg和1.0～2.0mg/kg之间,5种黄酮类成分的加标平均回收率均高于99.7％,相对标准偏差(RSD)小于1.34％(n=6);在最优条件下,对13批不同产地的黄芪进行检测,毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的含量范围分别在4.75～102.07mg/kg、13.84～276.99mg/kg、0～135.29mg/kg、5.33119.36mg/kg及2.76～41.18mg/kg之间;该法简便快速,重复性良好,结果准确可靠,可用于黄芪药材中5种主要黄酮类成分的含量测定.