miR-21在鸭胚胎期胸肌发育中的功能研究

摘要

为了阐明miR-21对鸭胸肌发育的调控作用,从表观遗传学的角度探讨鸭骨骼肌发育的调控机制,本课题组在前期利用鸭转录组mircroRNAs测序技术,发现miR-21在胚胎期第19天北京鸭胸肌内显著差异高表达于其他时期,且与骨骼肌发育正向调控因子MRF4和MyoG表达趋势一致,与负向调控因子MSTN表达趋势相反.通过序列比对，发现miR-21高度保守，和其亲缘关系最近的为原鸡，其次是火鸡和斑胸草雀。miR-21高表达于胸腿肌组织、肝脏和肌胃组织；时序表达谱显示miR-21 在胚胎期第19天表达量最高，胚胎发育初期和结束期表达量都较低。分离和培养鸭卫星细胞，并转染miR-21模拟物和抑制物，qRT-PCR、WB、EdU及流式细胞术检测发现miR-21促进鸭卫星细胞的增殖；qRT-PCR、WB及免疫荧光检测结果显示miR-21具有促进鸭卫星肌管形成的作用。对miR-21的研究目前主要集中在其对癌细胞增殖的影响方面，对正常发育的细胞尤其是骨骼肌细胞研究的还很少，本研究结果与Zuo等在猪骨骼肌和白立景在小鼠成肌细胞上的研究一致，在禽类上为首次研究。