亲水纳流液相色谱技术及其在蛋白组学分析中的应用

摘要

纳流液相色谱已成为现代蛋白质组学研究常规的分离工具.基于C18材料的反相液相色谱法可以提供高分辨的多肽/蛋白分离,很好地满足后端的质谱检测以及最终的蛋白鉴定.需要指出,反相色谱更适合于疏水多肽/蛋白的高分辨分离,而对于亲水性多肽/蛋白则显现出保留性差的缺点,无法有效分离并影响到后端质谱的鉴定.蛋白质组学体系的复杂性需求更丰富选择性的色谱分离.近年兴起的亲水作用色谱对于亲水多肽／蛋白的分离展现出了优良的效果，不仅能实现亲水物质的有效保留，并可实现高分辨分离。本文报道了基于亲水材料的纳流液相色谱技术，并考察了其在复杂多肽混合物的分离效果。结果表明，随着柱长增加，色谱峰容量显著提升，多肽混合物获得高分辨的分离效果。也考察了不同条件下峰容量的极限值。这一结果不仅为nanoHILIC-MS在蛋白组学研究中的应用提供了可行性探索，更重要的是，nanoHILIC-MS还将提供互补于nanoRPLC-MS的分离效果和蛋白鉴定本领，这将为Single Shot Proteomics技术提供新的分析工具。