E.tenella河北株免疫调节型重组DNA疫苗的构建及保护力分析

摘要

本研究将鸡柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)河北株EtMIC-2基因与鸡IL-2基因串联克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,构建重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,并用动物试验验证其保护效果,为下一步E.tenella的免疫调节型DNA疫苗的研制提供基础.用RT-PCR方法克隆出鸡IL-2基因、E.tenella河北株EtMIC-2基因,并连接到pMD18-T载体上进行测序;将目的基因克隆到pcDNA3.0载体,构建重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2,并转染293T细胞,用Western Blot方法验证表达.用构建好的重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2+FCA经腿部肌肉免疫雏鸡,通过测定抗球虫指数(AIC)评价免疫效果.结果表明:重组质粒pcDNA3.0-IL-2-EtMIC-2在293T细胞中表达出融合蛋白,并具有良好的免疫保护效果.