鸭瘟重组病毒穿梭载体的构建及分析

摘要

鸭瘟病毒为疱疹病毒科成员,其基因组约为150KB,含有多个复制非必须区.本实验选择已经证实的US2-S0RF3、US7-US8和UL15-UI18的非编码区作为插入位点构建构建穿梭载体P-US2-S0RF3-EGFP,P-UL15-UL18-EGFP,P-US7-US8-EGFP.在已感染疫苗毒的鸡胚成纤维细胞(chicken embryo fibroblasts,CEFs)中转染穿梭载体,收毒,进行噬斑筛选.结果以pBlusecriptⅡSK构建的穿梭载体未成功筛选到重组噬斑而用pUC18构建的穿梭载体成功筛选到重组噬斑.说明拯救鸭瘟重组毒的研究中.pBlusecriptⅡ载体可能不是最佳的适用载体,为以后重组病毒的拯救提供实验依据.