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细菌λRed重组技术的应用及其影响因素

摘要

由λ噬菌体上的exo、beta、gam三个基因分别编码的Exo、Beta和Gam蛋白组成λRed同源重组系统.λRed重组是细菌靶基因置换的有效技术,该技术发展迅速,已广泛应用于大肠杆菌等细菌染色体DNA的基因敲除、基因整合,可以对任何大小的DNA分子进行精确修饰.利用九Red重组系统不仅可以构建工程菌,还可以为研究细菌的致病机理和耐药机制提供新的方法.然而,许多应用因重组频率而受到限制,底物浓度、同源片段的长度、内源性核酸酶、错配蛋白等许多因素均可影响重组频率.

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