奶牛源微小隐孢子虫的分子鉴定及动物感染试验

摘要

为鉴定奶牛感染隐孢子虫种类,收集微小隐孢子虫卵囊.采用饱和蔗糖溶液漂浮法检查商丘市某奶牛场牛新鲜粪便样本的隐孢子虫卵囊,用18S rRNA基因对隐孢子虫进行PCR扩增和限制性片段长度多态性分析;基于GP60基因位点对微小隐孢子虫进行基因亚型鉴定.结果发现,103份样本中50份为隐孢子虫阳性,42份经形态学鉴定为安氏隐孢子虫,8份形态学未能鉴定到种.经限制性片段长度多态性分析,7个分离株为微小隐孢子虫,1个分离株为牛隐孢子虫;序列比对分析,7个微小隐孢子虫均为人兽共患基因亚型ⅡdA19G1.接种1头3d犊牛1×106个卵囊,潜隐期为3d,显露期为14d,于感染后第7d和第10d出现两个排卵囊高峰期,收集到大量纯卵囊.