转基因抗虫水稻T1Ab-6转化体特异性定性和定量检测方法的建立

摘要

本研究通过基因组步移和TAIL-PCR方法对转基因抗虫水稻T1Ab-6的外源基因插入整合结构进行了验证和完善，并建立了其转化体特异性的定性和定量PCR检测方法。旨在为转基因生物的检测和监管提供技术方法。以转基因水稻T1Ab-6转化体的外源基因插入位点基因组序列和外源插入片段/基因组连接区序列为靶标，建立了转基因水稻TlAb-6转化体特异性定性检测方法和实时荧光定量PCR检测方法。建立的转化体特异性定性PCR检测方法的两条引物分别位于TlAb-6外源基因插入位点一侧基因组和外源插入片段上，对建立的方法进行体系优化、重复性和灵敏度测试，优化后的检测体系灵敏度达到0.1ng并具有良好的检测重复性。结果表明建立的转化体特异性定性检测方法能科学有效检测转基因水稻Tl Ab-6。