HO-1/CO对脂多糖诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞线粒体融合的影响

摘要

目的：探讨血红素氧合酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体融合的影响. 方法：体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞以密度2×105/ml接种于96孔板,采用随机数字表法将其分为7组(n=5):空白对照组(C组)、LPS组(L组)、LPS+外源性一氧化碳释放分子-2(CORM-2)组(LC组)、LPS+氯高铁血红素(Hemin)组(LH组)、LPS+锌原卟啉-Ⅸ(Znpp-Ⅸ)组(LZ组)、LPS+CORM-2+Znpp-Ⅸ组(LCZ组)、LPS+Hemin+Znpp-Ⅸ组(LHZ组).L组加入10μg/ml LPS制备内毒素攻击肺泡Ⅱ型上皮细胞模型;LC组、LH组分别加入CORM-2100μM、Hemin20μM预处理1h,再加入10μg/ml LPS孵育;LZ组加入Znpp-Ⅸ10μM预处理0.5h,再加入10μg/ml LPS孵育;LCZ组、LHZ组分别先加入CORM-2100μM、Hemin20μM预处理1h,余处理同LZ组.于LPS孵育24h,采用ELISA法测定细胞上清液IL-6和TNF-α的含量,用Westernblot法测定HO-1和线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2、OPA1的表达. 结果：与C组比较,其余各组IL-6和TNF-α含量升高,HO-1蛋白表达上调,线粒体融合蛋白Mfn1、Mfn2和OPA1表达下调(P＜0.05).与L组、LCZ组和LHZ组比较,LC组、LH组IL-6、TNF-α含量降低,HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1蛋白表达上调(P＜0.05);LZ组IL-6、TNF-α含量升高,HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1蛋白表达下调(P＜0.05).与LC组、LH组比较,LZ组IL-6、TNF-α含量升高,HO-1、Mfn1、Mfn2和OPA1蛋白表达下调(P＜0.05).LC组和LH组间,L组、LCZ组和LHZ组间上述各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05). 结论：HO-1/CO上调脂多糖诱导的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体融合蛋白表达,促进线粒体融合.