丁苯酞对急性一氧化碳中毒大鼠血脑屏障ZO-1和Claudin-5蛋白表达的影响

摘要

目的：探讨丁苯酞(NBP)对急性一氧化碳(CO)中毒大鼠血脑屏障超微结构损伤的治疗作用及其对紧密连接相关蛋白(ZO-1、Claudin-5)表达的影响. 方法：按随机数字表法将144只健康雄性SD大鼠分为正常组、CO中毒组和NBP治疗组,每组48只.采用高压氧舱吸入法建立急性CO中毒动物模型并给予高压氧舱治疗.NBP治疗组于染毒后给予丁苯酞60mg/kg、每日2次灌胃,直至处死;正常组和CO中毒组给予等量纯橄榄油.各组分别于造模后1、3、7、14d各取4只大鼠,在透射电镜下观察大鼠血脑屏障超微结构的改变,用免疫荧光标记及Western Blot法观察ZO-1、Claudin-5蛋白的表达,用免疫荧光双标染色观察ZO-1、Claudin-5蛋白在脑组织中的定位关系. 结果：与正常对照组比较,中毒初期(＜7天)CO组大鼠血脑屏障超微结构严重损坏,脑组织ZO-1和Claudin-5蛋白表达明显减少(P＜0.05).与同一时间点CO中毒组比较,NBP治疗组BBB功能和超微结构相对完整,各时间点ZO-1和Claudin-5蛋白表达均明显增高(P＜0.05).Western Blot也证明了同样的趋势. 结论：NBP可能通过上调ZO-1和Claudin-5蛋白表达、维持急性CO中毒大鼠血脑屏障结构和功能的完整性,进而减轻一氧化碳中毒引起的脑损伤.