PCM靶向诊疗造影剂增强心肌分子显影及其体内分布的实验研究

摘要

目的:由于载药微泡造影剂具有体内循环时间短,血管穿透能力差,靶向治疗需要多次给药等缺点,故本研究拟制备一种心肌特异性靶向肽PCM修饰的载药液态氟碳纳米造影剂,并探讨其靶向心肌显影的能力及体内分布情况. 方法:采用双乳化法以及碳二亚胺法制备心肌导向肽PCM(WLSEAGPVVTVRALRGTGSW)靶向的荧光染料Di工标记的载卡维地洛(Carvedilol)液态氟碳纳米诊疗造影剂(PCM/C-PFPs)，检测其一般性质，光学显微镜观察热相变后造影剂的形态变化，免疫荧光法检测多肤与非靶向造影剂E2-PFPs的连接情况。将SD大鼠分为SonoVue组，靶向造影剂+低频聚焦超声组(PCM/C-PFPs+LIFU)，非靶向造影剂+低频聚焦超声(C-PFPs+LIFU)组，靶向造影剂组(PCM/C-PFPs)组，每组10只，考察各组在相同时间点心脏显影的情况，并采用DYF定量仪分析各组超声图像的声强度随时间的变化。分别于24h取各组心脏标本进行冰冻切片，激光共聚焦观察造影剂在心脏的分布情况，同时取PCM/C-PFPs+LIFU组大鼠不同时间点血清，采用荧光分光光度计考察PCM/C-PFPs造影剂在体内代谢分布情况。 结果:PCM/C-PFPs纳米造影剂呈球形且分布均匀，平均粒径和电位分别415.00±6.24nm和-20.27±1.55mV;流式细胞仪测得微球连靶率高达98.98±1.02;药物包封率为78.23±3.45;经加热后，PCM/PFP-PLGA造影剂在480C左右发生液-气相变产生微泡;体内显影实验显示，SonoVue和PCM/C-PFPs+LIFU组均显示出良好的超声显影效果，但Sonovue组在显影时间仅维持数分钟，而PCM/C-PFPs+LIFU组心脏的超声信号可持续至1h。同时在不同时间点，PCM/C-PFPs+LIFU组心脏显影的声强度明显高于其他各组(P<0.05)。在24h,PCM/C-PFPs+LIFU组的心脏冰冻切片中可见大量聚集的红色造影剂，明显多于其他各组。 结论:本研究成功制备了心肌靶向诊疗造影剂，其具有良好的靶向心脏超声显影和分布的特性，可有望实现心脏疾病的特异性诊断和靶向治疗。