大菱鲆胃质子泵(H+/K+ATPase)与消化机能发生的关系

摘要

胃质子泵(H+/K+ATPase)是胃酸分泌的关键酶.本试验首先采用RACE和PCR方法从大菱鲆的胃组织中提取RNA 克隆得到了H+/K+ATPase α亚基cDNA全长序列.结果表明:大菱鲆H+/K+ATPase α亚基序列全长3467 bp,开放阅读框2964bp编码988个氨基酸.与GenBank上其他物种比对发现,大菱鲆H+/K+ATPase α亚基与斑鳜同源性最高,为89％.进化树分析发现,H+/K+ATPase在进化上具有物种特异性.然后通过RT-PCR和荧光定量检测,大菱鲆H+/K+ATPase在胚胎孵化后22d开始表达,晚于大菱鲆胃腺出现的时间(16d),说明大菱鲆胃腺的发育完成并不代表胃功能的完善.另外,大菱鲆H+/K+ATPase除了在胃中大量表达之外,在食道中的表达量也很高.通过组织学观察认为,大菱鲆H+/K+ATPase在食道中大量表达是因为在发育上食道是胃的前体,因此保留了分泌H+/K+ATPase的能力.同时通过整体原位杂交试验表明:大菱鲆H+/K+ATPase会首先在食道的末端和胃的贲门处表达.