猪链球菌病菌株分离鉴定及致病性研究

摘要

目前已有足够流行病学资料证实,猪链球菌病(StreptococcusSuisse,SS)已经对中国乃至全世界养猪业和公共卫生构成了严重威胁.根据荚膜多糖(CPS)抗原性的不同,可将猪链球菌分为35个型,其中SS1、SS2、SSI/2、SS7、SS9和SS14为临床上的主要致病型.引起猪场发病的基因型因地域的不同在数量及种类上不尽相同,给临床的疫苗预防带来较大的困难.尽快准确地弄清存在于山西的猪致病性链球菌的分型及各型分布情况,并对其流行的菌株与市售疫苗菌株进行同源性分析,为养殖户选用预防疫苗提供依据.以GenBank中收录的猪链球菌各型cps基因序列为参考，利用Priner5.0和Oligo6.0设计引物，进行PCR检测，总检出率为80%。64株检为阴性的菌株均为非致病型。80株分属于6种主要致病型。经基因分析发现，87.5%含毒力因子gdh;62.5%含毒力因子mrp;58.75%含毒力因子epf;72.5%含毒力因子sly。对致病菌株的sly,epf,mrp分析结果显示:这三个主要毒力相关基因进行克隆和核苷酸序列分析未发生变异。经与GenBank中己收录序列分析结果:制苗用菌株同源性在96.3~99.9%，其中所测2型与制苗用2型菌株同源性在99.99%，与其它型菌株在96.3~97.6%;其中与7型在97.3%~97.6%;与9型在96.8%~97.0%;与1型在96.3%;与其它型在96.3%。对猪的致病性实验结果显示:接种2天后出现领下淋巴结和腹股沟淋巴结肿胀出血、肺脏、肾脏有出血点。病理组织学观察:可见大脑轻度水肿、肺小血管内有血栓形成、肺泡隔增宽;肾脏间质内有少量淋巴细胞浸润。