骨中蛋白质分离提取方法研究

摘要

骨中非胶原蛋白性有机物用0.6M DCl,0.5MK-P,HCl(pH2.0),0.5M NaCl和1﹪Na<,2>CO<,3>,逐级提取.0.6M DCl提取物乎都是碱性蛋白(包含组蛋白),0.5MK-P溶液提聚物主要是碱性蛋白(包括osteocalcin).HCl脱钙时溶解出酸性、中性及碱性蛋白,但中和后酸性蛋白随羟基磷灰石沉淀、中性蛋白存留在上清液中而得以分离.其它牢固结合在胶原蛋白纤维上的有机物被0.5MNaCl和1﹪Na<,2>CO<,3>,提聚出.各阶段提取的酸性、碱性蛋白质用SDS-聚丙烯酰凝胶电脉、StainsAll和CBB染色检测.肝素-琼脂糖凝胶、DEAE-葡聚糖凝胶被用于组蛋白、成骨蛋白((BMP)<,α2>HS-糖蛋白、骨唾液酸蛋白(BSP)等的精制.