菜豆几丁质酶基因对黄瓜的遗传转化及转基因植株的获得

摘要

本研究以黄瓜子叶节为外植体,采用农杆菌介导法将菜豆几丁质酶基因导入黄瓜(Cucumis sativus L.).系统探讨了影响遗传转化效率的主要因素.结果表明:子叶节预培养2 d,真空侵染5 min,在添加0.5 mg/L 6-BA、pH5.2的共培养基上培养4～5 d,遗传转化效率最高.根癌农杆菌菌株为EHA105,质粒pBch带有一个npt-Ⅱ基因和一个菜豆几丁质酶基因(chi).抗卡那霉素(kanr)的再生小植株经PCR和Southern检测,证明外源菜豆几丁质酶基因已整合到黄瓜基因组中.