羊红细胞Cu,Zn-SOD的纯化与特性研究

摘要

目的:从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD),并对Cu,Zn-SOD特性进行研究. 方法:采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、DE-FF柱层析的方法,对羊红细胞Cu,Zn-SOD进行分离纯化 结果:520g羊红细胞得Cu,Zn-SOD总活力为467000u,比活为8126u/mg.pro,纯化倍数为26.2,活性回收率为61％.该酶的最大紫外吸收波长为258nm,亚基相对分子量为16.1kD,每个亚基含一个铜原子和一个锌原子,N-末端氨基酸为丙氨酸,冻干粉样品中,α-螺旋占29.5％,β-折叠占46.3％. 结论:采用此方法分离纯化的Cu,Zn-SOD达到电泳纯,其特性与其它动物血液来源的Cu,Zn-SOD相一致。