sTRAIL基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

摘要

目的:克隆TRAIL基因的95-281位(sTRAIL),构建表达载体,建立原核表达体系,优化诱导表达的条件.方法:分离人外周血淋巴细胞,提取总RNA,RT-PCR,克隆sTRAIL的cDNA,构建原核表达载体,优化IRTG诱导的条件.结果:(1)克隆了TRAIL基因95-281位的cDNA,DNA测序结果与报道的一致.(2)构建了sTRAIL基因的原核表达载体,酶切结果与预期的一致.(3)转化宿主菌,优化IPTG诱导条件,发现3mmol/L,诱导3-4小时表达最好.结论:sTRAIL基因的克隆及表达为下游中试发酵及纯化奠定了上游的基础,也为研究TRAIL抗肿瘤的机制提供了可能.