嗜水气单胞菌基因工程疫苗研究

摘要

为了克隆、表达嗜水气单胞菌β-溶血素基因，构建抗嗜水气单胞菌的基因工程疫苗，我们应用PCR技术，扩增了嗜水气单胞菌ML316的β-溶血素基因，命名为AHL316HEM。将PER产物克隆到pGEM-T Easy vector，经分析验证后重组到pcDNA3.0中，构建了重组质粒。转化重组质粒的DH5α能在血琼脂培养皿中形成明显的β-溶血斑，重组菌胞外产物溶血价为1.28×104HU·mg-1，基因表达产物能被同源菌株的高免血清特异性地识别。将基因表达产物制成免疫刺激复合物(ISCOMs)疫苗，经腹腔免疫接种欧鳗，一次接种免疫保护率为87.5％，加强免疫后保护率为100％。上述实验结果证实我们克隆到嗜水气单胞菌β-溶血素基因，同时证实重组茵的胞外产物-ISCDMs疫苗具有良好的免疫原性。