人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达

摘要

目的：构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体，并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。rn 方法：用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞，抽提总RNA，经RT-PCR获得全长cDNA，与pcDNA3.1/myc-his(-)A真核表达载体连接，构建重组体pcDNA3.1A-hIFN-λ3，并在COS-7细胞中进行表达，采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。rn 结果：经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确，而且确为hIFNλ-3，与GeneBank报告序列完全一致，并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。结论：rn 本研究成功地克隆出hIFN-λ3基因编码序列并在COS-7细胞中获得瞬时表达，证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性，为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。