抗氨苄青霉素单克隆抗体的制备及初步鉴定

摘要

利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(Ampicillin，AMP)与匙孔喊血蓝蛋白(mcKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠，应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SV2/0)融合，建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。同上方法将氨苄青霉素连接到阳离子化的牛血清白蛋白(cBSA)上制备检测抗原，对AMP-KLH偶联物免疫小鼠产生的抗体进行检测。通过对杂交瘤细胞培养上清的检测、鉴定,筛选出8株高亲和力的杂交瘤细胞株，用其制备的腹水ELISA效价达到2×106，纯化后的单克隆抗体(McAb)可以应用于氨苄青霉素残留的快速检测。