O型口蹄疫病毒中国株、泛亚株VP1基因的克隆与原核表达

摘要

根据口蹄疫中国株(中国型)、泛亚株(中东-南亚型)流行毒株设计一对包含VP1部分基因编码区的特异性引物,扩增出VP1基因633bp的特异带,并将纯化的扩增产物克隆到pMD18-T载体上.再用设计的酶切位点将VP1基因连接到原核表达载体pET28a上,构建了重组质粒pET28a-VP1,转入BL21菌中进行原核表达.SDS-PAGE电泳表明,VP1基因在表达系统中高效表达.最后,对表达的蛋白通过包涵体洗涤及切胶纯化的方法进行纯化,获得了高纯度的VP1蛋白.